№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения РСК, полностью дано определение РСК, названы используемые компоненты реакции.
|
| РСК проводится в два этапа: I-этап. Взаимодействие антигена и антитела, связывание происходит в 1-й пробирке (опыт). Во 2-й (КА) и 3-й (КС) пробирках связывания не происходит, т.к. они являются контрольными, в них нет одного из ингредиентов (или антигена, или антитела).
|
| II-этап. Добавление гемолитической системы (гемолитическая сыворотка + эритроциты барана) для определения в каком состоянии находится комплемент (в связанном или свободном).
|
| В случае положительного результата в опытной пробирке не произойдет гемолиз ввиду отсутствия свободного комплемента.
В контрольных пробирках произойдет гемолиз т.к. в присутствии свободного комплемента гемолитическая сыворотка гемолизирует эритроциты барана.
|
| В случае отрицательного результата во всех 3-х пробирках произойдет гемолиз. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.
|
ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции определения токсигенности дифтерийных бактерий.
№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения реакции, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.
|
| На середину чашки с питательным агаром кладут фильтровальную бумагу, заранее смоченную антитоксической противодифтерийной сывороткой.
|
| С 2-х сторон от бумаги делают посев культур, выделенных от больных. Чашки помещают в термостат при t – 37оС на 24 часа.
|
| Через сутки учитывают результат: Линии преципитации (или «усики») образуются в местах взаимодействия экзотоксина с антитоксином. Происходит реакция нейтрализации токсина антитоксином.
|
| Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.
|
ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки цветной пробы для определения типа вируса полиомиелита.
№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения цветной пробы для определения типа вируса полиомиелита, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.
|
| В 3 пробирки с культурой клеток вносят по 0,25 мл вируссодержащего материала.
|
| Затем вносят по 0,25 мл типовых сывороток вируса полиомиелита (I, II, III) в соответствующие пробирки.
|
| Сверху заливают вазелиновым маслом по 0,6 мл. Инкубируют в термостате 48-72 часа.
|
| Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.
|
ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции иммунофлюоресценции прямой (РИФ).
№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения РИФ, полностью дано определение РИФ, названы используемые компоненты реакции.
|
| Готовится препарат, содержащий исследуемые микроорганизмы (АГ).
|
| Фиксируют его жидким фиксатором (ацетоном).
|
| Обрабатывают специфической люминесцирующей сывороткой. Отмывают избыток сыворотки.
|
| Высушивают препарат и рассматривают в люминесцентном микроскопе. При положительной реакции наблюдается свечение антигена. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.
|
ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР)
№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения ПЦР, полностью дано определение ПЦР, названы используемые компоненты реакции.
|
| Исследуемую ДНК собирают в пробирку. Прогревают. При этом комплементарные нити ДНК разъединяются. Этот этап называется денатурацией ДНК.
|
| К образовавшимся одноцепочечным ДНК присоединяют праймеры. Этот этап называется «отжигом» (присоединением).
|
| Фермент полимераза достраивает комплементарные цепи ДНК. Этот этап называется «элонгация» (удлинение).
Как правило, проводится 30 циклов, что позволяет получить 230 копий участка ДНК возбудителя.
|
| Объяснить механизм реакции.
|
ЧЕК-ЛИСТ Критерии оценки постановки реакции иммуноферментного анализа (ИФА)
№
| Критерии оценки
|
| Полностью названа цель применения ИФА, дано определение ИФА, названы используемые компоненты реакции.
|
| Специфический антиген адсорбируют в лунках полистеролового планшета. Инкубируют с испытуемыми сыворотками человека 30 минут.
|
| Отмывают несвязавшиеся иммуноглобулины промывочным раствором.
|
| Связавшиеся иммуноглобулины выявляют с помощью антиглобулиновой сыворотки, к которой прикреплен фермент пероксидаза. Инкубируют 30 минут.
|
| Добавляется субстрат (пероксид водорода) и индикатор (диамин бензидин), которые позволяют оценить ферментативную активность по интенсивности окраски. Прокомментировать полученный результат: принцип оценивания интенсивности окраски. Объяснить механизм реакции.
|